


橡膠樹(shù)褐皮?。ㄋ追Q死皮?。┦窍鹉z樹(shù)的一種世界性常見(jiàn)的重要割面病害,嚴(yán)重影響膠乳生產(chǎn)。
學(xué)術(shù)界對(duì)本病的研究由來(lái)已久。早在20世紀(jì)初,即1909年,Gallagher,W.J就開(kāi)始記載死皮的發(fā)生情況,至今已90多年。在這期間,人們對(duì)褐皮病的研究在生理學(xué)方面的研究較深較廣,學(xué)說(shuō)繁多,眾說(shuō)紛紜。但普遍認(rèn)為,死皮純屬于生理性病害。而在病理學(xué)方面,最早報(bào)道是1960年,Taysum認(rèn)為此病可能由某種病原細(xì)菌所致,Peries懷疑死皮與病毒有關(guān),但未見(jiàn)詳細(xì)的研究進(jìn)展報(bào)道。
20世紀(jì)70年代末,經(jīng)歷10年“文革”之后,時(shí)任植保系主任的鄭冠標(biāo)和我(學(xué)術(shù)秘書(shū))都想搞些科研。此時(shí),正值橡膠樹(shù)死皮病危害日益嚴(yán)重。鄭主任提出從病理學(xué)方面來(lái)探索研究橡膠樹(shù)死皮病的病因,因?yàn)檫@是經(jīng)歷幾十年未能解決的難題。面對(duì)這塊硬骨頭,我們啃得動(dòng)嗎?鄭主任鼓勵(lì)我和他一起摸索,我也抱著試試看的心態(tài)參與了這項(xiàng)研究工作。于是,從1979年開(kāi)始,我們天天跑林段,調(diào)查不同品系、不同樹(shù)齡膠樹(shù)的死皮病割面癥狀及樹(shù)冠的癥狀表現(xiàn)。我們一邊低頭查割面,一邊抬頭看樹(shù)冠,一株一株地細(xì)查。雖然脖子酸了,腿也軟了,眼又花了,但是,功夫不負(fù)有心人。我們終于發(fā)現(xiàn),死皮樹(shù)的樹(shù)冠也有癥狀,即有叢枝畸形枝條,死皮與這一癥狀可能有關(guān)系。這一跡象的發(fā)現(xiàn),使我們興奮得忘記了疲勞、饑渴。繼續(xù)查下去,連下班時(shí)間也忘了。調(diào)查中發(fā)現(xiàn)樹(shù)冠有畸形枝條(枝條莖干變扁、縮節(jié),其頂部葉片變小而成簇)的芽接樹(shù),90%會(huì)同時(shí)發(fā)生褐皮病,其余在半年至1年內(nèi)也會(huì)發(fā)生褐皮病,兩者關(guān)系密切。這一調(diào)查結(jié)果增強(qiáng)了我們進(jìn)一步深入研究褐皮病的信心。于是,我們立題從繼續(xù)大田調(diào)查及藥物診斷開(kāi)始,在國(guó)內(nèi)外首次從植物病理學(xué)方面,系統(tǒng)地研究橡膠樹(shù)褐皮病的傳染性。
我們的研究立題是“橡膠樹(shù)褐皮病的病因及其防治研究”,我們的研究工作就是圍繞病因及防治這兩大方面展開(kāi)的。
一、病因研究
1.藥物注射和環(huán)狀剝皮涂藥診斷病原。試驗(yàn)之前,在室內(nèi)用離體的病枝分別插入各種藥液,每天觀察枝條的反應(yīng)。藥物浸泡一周之后發(fā)現(xiàn),有幾種抗菌素處理的枝條存活時(shí)間最長(zhǎng),其余藥物處理的枝條都逐一枯死。我們根據(jù)這一預(yù)備性試驗(yàn)結(jié)果,開(kāi)始了藥物診斷病原的試驗(yàn)。
注射試驗(yàn)的材料是山東煙臺(tái)生產(chǎn)的仿美塑料注射器,采用自行車打氣筒通過(guò)不斷打氣加壓,把藥物輸入樹(shù)體內(nèi),使藥物在樹(shù)體內(nèi)產(chǎn)生藥效反應(yīng)。這個(gè)試驗(yàn)程序需要用較大而持久的體力,不斷加氣保持較大壓力注射藥液,已年過(guò)半百的鄭主任不顧自已年老體衰,硬是堅(jiān)持搶著干。大家在他的帶領(lǐng)下,終于順利完成了7個(gè)藥物注射試驗(yàn)。注射試驗(yàn)于1979年10月至1982年進(jìn)行了3次,采用青霉素、四環(huán)素;1983年第4至第7次采用保01、青霉素和四環(huán)素。注射試驗(yàn)結(jié)果表明:注射青霉素、四環(huán)素的病樹(shù),干膠增產(chǎn)效果明顯,用協(xié)方差分析,這兩種藥和清水對(duì)照之間差異顯著(P﹥0.05);保01注射1次,藥效可持續(xù)1年以上,其干膠增產(chǎn)效果在1年以內(nèi)較為顯著(P﹥0.05),與青霉素、四環(huán)素比較,藥效更穩(wěn)定,效果較優(yōu)。
環(huán)狀刮皮涂藥試驗(yàn)于1984年開(kāi)始小區(qū)試驗(yàn)和中間實(shí)驗(yàn)。其中小區(qū)試驗(yàn)是間隔期試驗(yàn),季度刮皮涂藥處理試驗(yàn)3個(gè),每月刮皮涂藥試驗(yàn)2個(gè)。試驗(yàn)結(jié)果表明,季度環(huán)狀刮皮涂藥對(duì)病情的控制效果優(yōu)于每月環(huán)狀刮皮涂藥。1984-1986年進(jìn)行了連續(xù)3年的刮皮涂藥小區(qū)試驗(yàn),并作病情比較分析。結(jié)果表明:抗菌素的防治效果是比較好的;第1個(gè)中間試驗(yàn)的是1984-1986年在試驗(yàn)農(nóng)場(chǎng)3隊(duì)28個(gè)樹(shù)位8400株膠樹(shù)中進(jìn)行,第2個(gè)是1985-1986年在西慶農(nóng)場(chǎng)5500株死皮樹(shù)中進(jìn)行。還有,在興隆華僑農(nóng)場(chǎng)以及南林、西聯(lián)、樂(lè)中等農(nóng)場(chǎng)進(jìn)行了5個(gè)推廣品系對(duì)保01的反應(yīng)試驗(yàn)(主要是對(duì)防治效果、干膠產(chǎn)量方面的影響),以上4個(gè)農(nóng)場(chǎng)參試樹(shù)總計(jì)為55168株。
1979-1986年,使用保01等藥劑的小區(qū)試驗(yàn)和中試結(jié)果表明:無(wú)論是年度間還是用不同的施藥方法,這些藥物在防治上都有效果。一是使干膠增產(chǎn),特別是無(wú)生產(chǎn)力的重病樹(shù)轉(zhuǎn)割陰刀,可恢復(fù)一定的產(chǎn)膠能力;二是發(fā)病率及發(fā)病指數(shù)有所降低,病情得到了控制。
2.電鏡檢查。在大田調(diào)查、藥物診斷的基礎(chǔ)上,還必須借助電鏡觀察,在病樹(shù)組織內(nèi)尋找病原物。當(dāng)時(shí)的熱作兩院還沒(méi)有電鏡,在院外電鏡檢測(cè)一個(gè)樣品就要4000多元,昂貴的檢測(cè)費(fèi)嚇得我們差點(diǎn)卻步不前。幸好遇到陳乃榮先生(當(dāng)時(shí)熱作所的科研人員),他得知我們的困難后,介紹中科院生化所彭加木(已故)、陳作義與我們合作,一起研究橡膠樹(shù)褐皮病,他們負(fù)責(zé)電鏡檢測(cè),研究成果共享。我們得到上海生化所所長(zhǎng)曹天欽的大力支持,在病毒組的陳作義、沈菊英協(xié)助下,幾經(jīng)檢測(cè),終于在1982年5月第1次在GT1和RRIM600的病樹(shù)割面組織內(nèi)觀察到多形態(tài)的RLO(現(xiàn)稱類細(xì)菌體BLO)。接著1983年2月初,在3株GT1病樹(shù)根部皮層組織中也觀察到各種形態(tài)的RLO。1983年6月,在IAN6645及PB28/59病樹(shù)樹(shù)冠上的叢枝病枝中又觀察到RLO,而健康對(duì)照樣品均未發(fā)現(xiàn)RLO。1989年在混合品系的病樹(shù)叢枝樣品中發(fā)現(xiàn)RLO和MLO(現(xiàn)稱為植原體phytoplasma)。由于割面病組織內(nèi)、病根部組織中的RLO病理學(xué)形態(tài)、大小與樹(shù)冠叢枝病枝組織內(nèi)的相似,同時(shí),凡有叢枝病的橡膠樹(shù)(60%的實(shí)生樹(shù)和90%的芽接樹(shù))的割面都同時(shí)會(huì)有褐皮病,其余的半年至一年也會(huì)發(fā)生褐皮病,兩者關(guān)系密切。因而我們認(rèn)為,樹(shù)冠的叢枝病可能就是褐皮病的一種癥狀。
從上述用保01、青霉素、四環(huán)素等藥劑防治褐皮病有療效,而用電鏡觀察又在病樹(shù)根莖葉組織內(nèi)發(fā)現(xiàn)了RLO的事實(shí),可以認(rèn)為橡膠樹(shù)褐皮病的病原就是RLO(BLO)。橡膠樹(shù)叢枝病是由RLO和MLO混合侵染所致。
3.嫁接傳病試驗(yàn)。其目的是證明橡膠樹(shù)褐皮病、橡膠樹(shù)叢枝病的傳染性,以及兩病的相互關(guān)系。傳病試驗(yàn)包括芽接和皮接兩個(gè)試驗(yàn)。
①芽接傳病試驗(yàn)。于1983年7月和1985年5月分別處理。試驗(yàn)結(jié)果表明,從芽接到芽接株發(fā)病,歷時(shí)均21個(gè)月左右,即叢枝病潛伏期約為21個(gè)月。傳染性測(cè)定:第1次處理,用病芽片嫁接的砧木上抽出不定芽發(fā)病率為21.67%,而健芽片嫁接健砧木的對(duì)照發(fā)病率為0;第2次芽接叢枝病芽片的砧木抽出的不定芽發(fā)病率為22.86%,健芽片嫁接叢枝病砧木上長(zhǎng)出的不定芽發(fā)病率為22.22%,而對(duì)照(健芽×健砧木)發(fā)病率為0。上述結(jié)果可概括為,病芽片×健砧木(2次)、健芽片×病砧木,其發(fā)病率均為22%左右,而健芽片×健砧木發(fā)病率均為0。這說(shuō)明,橡膠樹(shù)叢枝病可以通過(guò)嫁接傳染,是一種傳染性病害。
橡膠樹(shù)叢枝病與褐皮病的關(guān)系測(cè)定。材料選用1983年7月芽接的叢枝病樹(shù)和同期芽接的健康樹(shù)(對(duì)照)各12株,于1988年5月16日開(kāi)割(即芽接傳病5年后),同年10月底停割,67割次,1989年5-10月,58割次。2年割膠過(guò)程中,健康對(duì)照樹(shù)的割皮鮮亮無(wú)斑塊,膠樹(shù)排膠正常,能測(cè)出干膠含量;而叢枝病樹(shù)上的割皮呈水漬狀,其中有2株病樹(shù)開(kāi)始出現(xiàn)褐斑。試割的12株病樹(shù)中,4株膠乳不能流到膠杯中,2株雖有少量膠乳流到膠杯內(nèi),但膠水稀,膠線薄,很難測(cè)出干膠含量,其余6株病樹(shù)從開(kāi)割至次年底割線一直干枯。試驗(yàn)結(jié)果表明,嫁接叢枝病芽片后的開(kāi)割膠樹(shù)從開(kāi)割就表現(xiàn)死皮癥狀、割皮干枯,印證了大田的調(diào)查結(jié)果,即膠樹(shù)樹(shù)冠有叢枝病的癥狀,割面90%出現(xiàn)干枯現(xiàn)象,表明了橡膠褐皮病與叢枝病關(guān)系密切。同時(shí),芽接傳病試驗(yàn)也使我們認(rèn)識(shí)到,苗圃的叢枝病芽條作為芽接材料的危害性,它是大田橡膠褐皮病的初侵染來(lái)源。這一發(fā)現(xiàn)為后來(lái)研制褐皮病綜合防治從苗圃抓起的技術(shù)提供了科學(xué)依據(jù)。
②皮接傳病試驗(yàn)。在我們進(jìn)行皮接傳病試驗(yàn)之前,有人曾在海南2個(gè)農(nóng)場(chǎng)搞過(guò)皮接橡膠褐皮病傳病試驗(yàn)而均未獲成功。因此,持生理學(xué)觀點(diǎn)的人更強(qiáng)調(diào)認(rèn)為,橡膠褐皮病純粹是生理病,而不是傳染病。更甚者有位院領(lǐng)導(dǎo)在1984年衛(wèi)星農(nóng)場(chǎng)的橡膠生理會(huì)議休息時(shí),當(dāng)著眾多會(huì)議代表的面說(shuō):“我認(rèn)為橡膠死皮就是生理病,我不會(huì)支持病理的?!蔽覀冎?,實(shí)踐是檢驗(yàn)真理的唯一標(biāo)準(zhǔn),而那位院領(lǐng)導(dǎo),在未做過(guò)多少試驗(yàn)的情況下就這么武斷地說(shuō),為此,我感到遺憾,更感到一種新的壓力。特別是1985年10月,鄭主任調(diào)離兩院后,我感到孤立無(wú)助,滿肚子怨氣。這時(shí),還有人幸災(zāi)樂(lè)禍地問(wèn)我:“鄭冠標(biāo)走了,死皮課題還搞嗎?”他這一問(wèn),倒是一下激發(fā)了我的斗志,我當(dāng)即回答:“一定要搞下去!”同時(shí),激動(dòng)地暗下決心:不搞個(gè)水落石出,誓不罷休!于是,冷靜下來(lái)后,我就計(jì)劃著開(kāi)始5省區(qū)的橡膠褐皮病流行規(guī)律調(diào)查、血清檢測(cè),并繼續(xù)進(jìn)行嫁接傳病試驗(yàn)。
回想在20世紀(jì)80年代初,我們?cè)?0齡開(kāi)割樹(shù)上重復(fù)進(jìn)行了多次皮接傳病試驗(yàn),但均告失敗。我們從多次失敗的教訓(xùn)中,認(rèn)真總結(jié),尋找出了失敗原因,認(rèn)為失敗與多方面的綜合因素有關(guān)。因此,從諸方面作了改進(jìn)。1987年開(kāi)始栽培橡膠苗作為5年后皮接的砧木。1993年和1995年2次皮接都邀請(qǐng)對(duì)芽接有豐富經(jīng)驗(yàn)的許來(lái)玉同志(橡膠所育種組科研人員)來(lái)幫助。他成功地解決了皮接時(shí)膠乳對(duì)接穗與砧木粘合的干擾。皮接之前,皮接材料砧木、接穗均作血清檢測(cè)各3次,選擇確定不帶菌的健康苗木作砧木,確定明顯表現(xiàn)陽(yáng)性的帶菌褐皮病株的病皮作為接穗,2次皮接傳病的成活株共19株,其中GT1作接穗的7株,RRIM600接穗的12株。皮接3個(gè)月后開(kāi)始表現(xiàn)癥狀,發(fā)病率在29%-50%之間。其癥狀是:砧木植株樹(shù)皮組織呈現(xiàn)出褐色斑紋或水漬狀病灶;5年后開(kāi)割,出現(xiàn)割線排膠不正常,割線有小段不排膠等現(xiàn)象。這些癥狀與大田開(kāi)割膠樹(shù)典型的褐皮病癥狀是相符的。皮接傳病成活株通過(guò)血清試驗(yàn),結(jié)果是:1993年皮接成活9株,其中5株呈陽(yáng)性反應(yīng),即5株試驗(yàn)樹(shù)已感染褐皮病,帶菌率為55.6%;1995年皮接成活10株,其中4株呈陽(yáng)性反應(yīng),即4株試驗(yàn)樹(shù)也感染褐皮病,帶菌率為40%。接著選擇在血清檢測(cè)中,呈現(xiàn)陽(yáng)性的感病樹(shù)取樣進(jìn)行電鏡檢測(cè)。通過(guò)電鏡檢查,在病皮韌皮部篩管細(xì)胞內(nèi),均可觀察到病原物——植原體,而在健康對(duì)照株的相應(yīng)部位則沒(méi)有發(fā)現(xiàn)植原體。這2次皮接傳病試驗(yàn)從1987年準(zhǔn)備苗木開(kāi)始,至1998年皮接傳病成功為止,歷時(shí)11年,從皮接的病樹(shù)癥狀表現(xiàn)、割膠觀察、血清檢測(cè)(微量沉淀和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)),以及電鏡檢查等試驗(yàn)均表明,橡膠褐皮病已通過(guò)皮接的方式傳染到健康樹(shù)上,橡膠褐皮病是可以通過(guò)嫁接(芽接、皮接)傳病的一種傳染性病害。
1988-1992年,我和黃慶春、羅大全(1990年開(kāi)始)、葉沙冰對(duì)華南5省區(qū)的橡膠墾區(qū)進(jìn)行了褐皮病發(fā)生規(guī)律調(diào)查。結(jié)果表明:緯度越低,發(fā)病越重,高溫多濕是褐皮病發(fā)生的重要條件;不同品系對(duì)褐皮病有不同的抗病力,PR107、GT1病情較輕,具有一定抗病力,而RRIM600、PB86則較感??;同一品系,樹(shù)齡越大,發(fā)病越重;采膠強(qiáng)度如割膠次數(shù)和深度、刺激劑等因素直接影響膠樹(shù)的抗病力,與發(fā)病有密切關(guān)系。從林段病株的非隨機(jī)分布,及病樹(shù)對(duì)抗菌素的明顯反應(yīng)的現(xiàn)象,可以看出橡膠樹(shù)褐皮病是一種傳染性病害。
4.血清學(xué)測(cè)定。采用叢枝病抗血清為抗體與待測(cè)樣品(抗原)起反應(yīng)的方法,測(cè)定樣品的病原的存在與滴定度(濃度)。典型橡膠褐皮病樹(shù)的檢測(cè),用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))技術(shù)檢測(cè)褐皮病樣品和橡膠叢枝病樣品,均表現(xiàn)有特異性反應(yīng),而健康長(zhǎng)春花則呈非特異性反應(yīng)。試驗(yàn)結(jié)果表明,橡膠褐皮病與橡膠叢枝病具有共同的抗原結(jié)構(gòu)。在試驗(yàn)中,使用長(zhǎng)春花毒株(即感染橡膠叢枝病的長(zhǎng)春花植株)制備的抗血清測(cè)定與橡膠叢枝病樹(shù)制備的抗血清測(cè)定結(jié)果一致,這種血清關(guān)系啟示我們,可以采用橡膠叢枝病抗血清檢測(cè)橡膠褐皮病。因此,在嫁接傳病試驗(yàn)中,我們不僅從癥狀表現(xiàn)方面選擇有病的接穗和健康的苗木,而且還使用橡膠叢枝病抗血清檢測(cè)接穗、砧木的帶菌情況(如前述)的技術(shù),從而提高了嫁接傳病試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。
5.分子檢測(cè)。主要應(yīng)用于檢測(cè)橡膠叢枝病植原體的存在。以感染橡膠叢枝病的長(zhǎng)春花總DNA為模板,通過(guò)特異引物P1、P2進(jìn)行PCR擴(kuò)增,可以擴(kuò)增出一條860 bp左右的片斷。而健康長(zhǎng)春花則不能擴(kuò)增出此片段。染病的橡膠樹(shù)(RRIM600、GT1)總DNA擴(kuò)增結(jié)果也與此相同,此860 bp的片斷與引物設(shè)計(jì)Oenothera植原體16 Sr DNA P1至P2之間的距離863 bp相符合,說(shuō)明已按預(yù)期設(shè)計(jì)擴(kuò)增出橡膠叢枝病植原體的部分16 Sr DNA序列,而且所設(shè)計(jì)的引物可以用做橡膠叢枝病PCR檢測(cè)試驗(yàn)材料。
核酸雜交結(jié)果顯示,感染叢枝病橡膠樹(shù)的樣品呈強(qiáng)烈的陽(yáng)性反應(yīng),而對(duì)照也有微弱的陽(yáng)性反應(yīng)。與PCR比較,說(shuō)明PCR檢測(cè)的靈敏度較核酸雜交高。橡膠樹(shù)叢枝病如前述由植原體和BLO復(fù)合感染,但由于對(duì)BLO的遺傳特征所知甚少,未見(jiàn)其16 Sr DNA序列報(bào)道,故未將其列為靶序列加以擴(kuò)增。
我們?cè)谒幬镌\斷病原、電鏡檢查、嫁接傳?。ㄑ拷觽鞑?、皮接傳?。?、大田發(fā)生規(guī)律調(diào)查、血清學(xué)測(cè)定、分子測(cè)定等試驗(yàn)中,從多方面證明了橡膠樹(shù)褐皮病、橡膠樹(shù)叢枝病的病原及傳染性。從總的來(lái)說(shuō),我認(rèn)為:
1.橡膠樹(shù)褐皮病在林段中呈非隨機(jī)分布,在平坦林地隨膠工割膠路線連株發(fā)生,在山地則隨環(huán)山行連株發(fā)生,說(shuō)明橡膠褐皮病存在相互傳染的跡象。1979-1986年7年中,使用保01、青霉素、四環(huán)素等抗菌素探索性防治褐皮病,無(wú)論在年度間重復(fù)或不同的施藥方法,這些抗菌素都有一定防治效果。試驗(yàn)結(jié)果表明,橡膠樹(shù)褐皮病對(duì)抗菌素的反應(yīng)是敏感的;芽接傳病試驗(yàn)樹(shù),從一開(kāi)割就發(fā)生死皮,橡膠樹(shù)褐皮病可以通過(guò)病皮皮接傳染;電鏡檢測(cè)證明,類細(xì)菌體(BLO)是橡膠樹(shù)褐皮病的重要致病菌之一。
2.橡膠叢枝病的致病力測(cè)定、抗菌素效果反應(yīng)及電鏡觀測(cè)等試驗(yàn)的結(jié)果表明,橡膠叢枝病是由植原體(即MLD)和類細(xì)菌體(BLO)混合侵染所引起的一種傳染性病害。
3.膠園實(shí)地多點(diǎn)調(diào)查,病芽嫁接的罹病膠樹(shù)與同齡對(duì)照健康樹(shù)的試割產(chǎn)膠表現(xiàn)及血清學(xué)測(cè)定、分子學(xué)檢測(cè)等試驗(yàn)的結(jié)果說(shuō)明,橡膠叢枝病和褐皮病有密切關(guān)系。通過(guò)橡膠叢枝病芽嫁接途徑可以引起橡膠褐皮病??梢哉J(rèn)為,增殖苗圃中嫁接叢枝病芽片是成齡開(kāi)割膠樹(shù)褐皮病的初侵染來(lái)源之一。
4.由于采膠強(qiáng)度過(guò)大引起的割面干涸(即死皮)是一種生理性病害,病樹(shù)休割一段時(shí)間后,可恢復(fù)產(chǎn)膠能力,因而這種割面干涸生理病是有可逆性的,而且沒(méi)有傳染性。而由BLO等病原菌引起的褐皮病,病樹(shù)割線不產(chǎn)膠一般是不可逆的(中輕病樹(shù)經(jīng)治療可以恢復(fù)產(chǎn)膠)。這種病理性褐皮病是有傳染性的。我們認(rèn)為,排膠量過(guò)大時(shí),由于降低了橡膠樹(shù)的抗病力,最初可能發(fā)生生理性干涸,但是若在病原菌存在的情況下,就會(huì)感染褐皮病,這就是人們所說(shuō)的先生理后病理的繼發(fā)性褐皮病。
5.試驗(yàn)樣品采集的時(shí)間、部位及樹(shù)齡大小與試驗(yàn)結(jié)果有重要關(guān)系。在春天,病原菌隨樹(shù)液回流到地上部位時(shí),采集葉、莖樣品,電鏡檢查可看到病原菌。皮接傳病試驗(yàn),砧木應(yīng)選用幼齡實(shí)生苗;接穗(病皮)宜選用經(jīng)檢測(cè)證實(shí)帶有褐皮病原的、同時(shí)發(fā)病較輕的植株,在病健交界處取樣,以保證樣品本身既能帶菌,又有較強(qiáng)的生命力,能與砧木的形成層愈合,把病害傳到健康砧木上。
二、防治研究
1.藥劑篩選。在藥物診斷病原過(guò)程發(fā)現(xiàn)保01、青霉素、四環(huán)素等抗菌素,對(duì)橡膠褐皮病樹(shù)有防病增產(chǎn)作用基礎(chǔ)上,進(jìn)行藥劑篩選試驗(yàn),結(jié)果均表明,上述3種藥劑的防效以保01為最好,藥效較穩(wěn)定。因此,大田防治應(yīng)用的農(nóng)藥選用了保01。
?。玻巹┑姆啦C(jī)理研究。試驗(yàn)結(jié)果表明,保01、青霉素防治橡膠褐皮病的作用機(jī)理,主要是通過(guò)抑制病原菌生長(zhǎng)和繁殖,以致破壞菌體,從而達(dá)到防病增產(chǎn)效果。
為了弄清楚所使用的藥物對(duì)干膠理化性能的影響,我們委托兩院加工所測(cè)定了用藥后的干膠理化性能。每種處理累積干膠2-3公斤供化驗(yàn)用。化驗(yàn)結(jié)果,保01、青霉素、四環(huán)素和清水對(duì)照等項(xiàng)處理的干膠,其理化性能(如華來(lái)氏塑性、硫化條件、卲氏硬度、定伸強(qiáng)力、扯斷拉長(zhǎng)率、扯斷強(qiáng)力、老化系數(shù)等)均屬正常值范圍,無(wú)不良表現(xiàn)。
保01對(duì)開(kāi)割樹(shù)褐皮病的生產(chǎn)性大田防治試驗(yàn),從1984-1990年,在33個(gè)農(nóng)場(chǎng)22萬(wàn)株樹(shù)上實(shí)施。在海南、云南、廣東等省不同地區(qū),以不同涂藥方法(環(huán)狀刮皮涂藥和割線涂藥法),不同品系和不同樹(shù)齡的開(kāi)割膠樹(shù)進(jìn)行了防病增產(chǎn)試驗(yàn)。同時(shí),還在海南龍江農(nóng)場(chǎng)42隊(duì)、21隊(duì)設(shè)立觀察點(diǎn),定樹(shù)位、定株、定病灶觀察。試驗(yàn)的結(jié)果是用藥后病灶明顯縮小。為了能獲得可靠的生產(chǎn)性大田使用的第一手材料,我們?cè)谡{(diào)查期間,每天清晨4點(diǎn)半鐘就起床,乘車到10多公里外的觀察點(diǎn)割一刀查一刀病情,所以,我們的司機(jī)說(shuō):“我最怕跟陳老師開(kāi)車,早早就要起床。”這樣調(diào)查,雖然辛苦點(diǎn),但結(jié)果換來(lái)的是心里踏實(shí)和信心更足。大面積的防治試驗(yàn)和定點(diǎn)觀察的結(jié)果表明:施用濃度為500?g/ml的保01藥劑、間隔期1.5個(gè)月1次的割線涂藥法有良好的防治效果。在開(kāi)割幼樹(shù)上施用保01,對(duì)褐皮病有更顯著的預(yù)防效果。保01對(duì)中輕病樹(shù)有明顯的控制和治療作用。對(duì)因病停割樹(shù)復(fù)割,可在不同程度上恢復(fù)產(chǎn)膠能力。品系反應(yīng)和中試結(jié)果基本相同,RRIM600、PB86、GT1等品系防效較好,PR107反應(yīng)有地區(qū)差異。
橡膠樹(shù)褐皮病的發(fā)生、擴(kuò)展與多種因素有關(guān)。因此,對(duì)褐皮病的防治必須采用以防為主,綜合防治的措施。要從繁殖材料抓起,消滅苗圃內(nèi)的叢枝病株,連根挖起,燒毀叢枝病株,避免帶病芽條(芽片)芽接成苗后流入大田。化學(xué)防治必須配合控制采膠強(qiáng)度,加強(qiáng)田間管理,才能有效地發(fā)揮藥物效力。因此,綜合防治技術(shù)包括:①消滅初侵染來(lái)源;②化學(xué)防治;③控制采膠強(qiáng)度;④加強(qiáng)膠園管理?!跋鹉z褐皮病綜合防治技術(shù)的研究”由本所負(fù)責(zé)制定計(jì)劃并實(shí)施,海南農(nóng)墾局農(nóng)林處范會(huì)雄、吳嘉漣、吳丁顏等人負(fù)責(zé)組織領(lǐng)導(dǎo)工作,以及總局屬下的黃嶺、晨星、中建、和嶺、新盈、昆侖等6個(gè)農(nóng)場(chǎng)組成綜防研究協(xié)作組。1992-1994年,參試開(kāi)割樹(shù)達(dá)172萬(wàn)株,其中開(kāi)割幼樹(shù)119萬(wàn)株,中齡以上復(fù)割病樹(shù)52萬(wàn)株。試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明,消滅初侵染來(lái)源,清除增殖苗圃1個(gè)叢枝病樹(shù)樁,即可避免24株帶病膠樹(shù)流入大田,減少經(jīng)濟(jì)損失0.65萬(wàn)元,同時(shí)還可提高土地資源利用率。化學(xué)防治的策略是,重點(diǎn)保護(hù)開(kāi)割幼樹(shù),全面涂施保01,其防治效果達(dá)極顯著水平。對(duì)1-3級(jí)中輕病樹(shù)施用保01,有較好的抑制和治療作用。對(duì)中齡以上因病停割樹(shù)復(fù)割施藥后,可在一定程度上抑制病灶擴(kuò)展。3年實(shí)踐證明,綜合防治褐皮病的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益是顯著的。消滅初侵染來(lái)源、保證健康苗出圃,可為國(guó)家節(jié)約大量投入資金和有效地利用土地資源,并為大田高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)打下良好基礎(chǔ)。以化學(xué)防治為主,綜合防治橡膠褐皮病的防治成本和經(jīng)濟(jì)效益比是1:6.23,平均單株純利達(dá)2.54元。保01與乙烯利混用后,不僅能同樣防病,還能增加干膠產(chǎn)量,其經(jīng)濟(jì)效益更高,防治成本與綜合經(jīng)濟(jì)效益比值是1:30.5,平均單株純利達(dá)6.80元。
保01與乙烯利混合施用的試驗(yàn),始于保01中試期間,在興隆農(nóng)場(chǎng)章創(chuàng)鵬技術(shù)員配合下,在該場(chǎng)實(shí)施,結(jié)果表明,保01與乙烯利混用可起到很好的防病增產(chǎn)作用。后來(lái),在綜合防治研究中,在室內(nèi)測(cè)定了乙烯利對(duì)保01藥效的影響,室外測(cè)定保01與乙烯利混用的增產(chǎn)效果。室內(nèi)與室外測(cè)定結(jié)果一致表明:保01與乙烯利混合使用后,兩種藥效不會(huì)互相干擾。大面積試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明,生產(chǎn)上應(yīng)用保01與乙烯利混用的技術(shù)措施,不僅可以防治褐皮病,而且還可以達(dá)到增加干膠的作用,同時(shí)混合后可節(jié)省施藥用工,從而降低生產(chǎn)成本,提高收入。
三、研究成果
本人自1985年開(kāi)始主持橡膠樹(shù)褐皮病研究以來(lái),執(zhí)行了1個(gè)國(guó)家自然科學(xué)基金課題、2個(gè)農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)課題研究項(xiàng)目,1個(gè)自選課題研究項(xiàng)目,獲得的成果如下:
1.1985-1990年“橡膠樹(shù)褐皮病病因及防治研究”(農(nóng)業(yè)部“七五”重點(diǎn)課題)。本項(xiàng)目于1990年12月通過(guò)農(nóng)業(yè)部主持的科技成果鑒定,核準(zhǔn)編號(hào)(91)農(nóng)科果鑒字171號(hào),1992年獲農(nóng)業(yè)部科技進(jìn)步三等獎(jiǎng)。專家鑒定意見(jiàn)認(rèn)為:“本研究在國(guó)內(nèi)外首次證明橡膠樹(shù)褐皮病是一種傳染性病害,明確了類立克次氏體(RLO現(xiàn)稱為BLO類細(xì)菌體),是橡膠樹(shù)褐皮病的主要病因之一。能結(jié)合生產(chǎn)上的重大問(wèn)題立題,指導(dǎo)思想明確,在死皮研究上立論獨(dú)創(chuàng)。該項(xiàng)研究在國(guó)際同類研究中處于領(lǐng)先地位?!?/p>
參加本項(xiàng)目研究的本單位人員有鄭冠標(biāo)、陳慕容、楊紹華、葉沙冰、唐文瑛、黎寶文、楊小英等,協(xié)作單位及人員有中科院上海生化所陳作義、沈菊英,海南農(nóng)墾局及下屬的樂(lè)中農(nóng)場(chǎng)、華僑管理局的興隆華僑農(nóng)場(chǎng)等。
2.1990-1992年“橡膠樹(shù)褐皮病傳染病因的研究”(國(guó)家自然科學(xué)基金課題)。按計(jì)劃完成,發(fā)表2篇論文。
3.1991-1995年“橡膠樹(shù)褐皮病傳播媒介及綜合防治技術(shù)的研究”(農(nóng)業(yè)部“八五”重點(diǎn)課題)。本項(xiàng)目的綜合防治技術(shù)研究,于1995年9月通過(guò)農(nóng)業(yè)部組織、中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院主持的科技成果鑒定,核準(zhǔn)編號(hào)(95)農(nóng)科果鑒字032號(hào)。1996年獲海南省科技進(jìn)步三等獎(jiǎng)。專家鑒定意見(jiàn)認(rèn)為,大面積開(kāi)展“橡膠樹(shù)褐皮病綜合防治技術(shù)的研究”,在國(guó)內(nèi)外尚屬首次報(bào)道,此項(xiàng)研究能急生產(chǎn)之所需,技術(shù)路線正確,數(shù)據(jù)可靠,該項(xiàng)研究在國(guó)內(nèi)外同類研究中處于領(lǐng)先水平。
參加本項(xiàng)目研究的人員有陳慕容、羅大全、黃慶春、葉沙冰,海南農(nóng)墾局范會(huì)雄、吳嘉漣、吳丁顏、朱炳彪、郭澤忠、吳清岳、陳興昌、陸智維等20人。
4.1990-1995年“保01防治橡膠樹(shù)褐皮病技術(shù)的推廣應(yīng)用研究”(自選項(xiàng)目)。本項(xiàng)目研究論文在中國(guó)熱帶作物學(xué)會(huì)1995年植保專委會(huì)年會(huì)上獲優(yōu)秀論文二等獎(jiǎng)。
發(fā)表本研究論文約20篇,其中,參加國(guó)際學(xué)術(shù)討論會(huì)3篇(1994,1997,1999年各1篇,均被收編出版),在學(xué)報(bào)類刊物發(fā)表論文7篇。
橡膠樹(shù)褐皮病(病理性死皮)的研究,從1979年開(kāi)始,直至2000年12月本人返聘結(jié)束時(shí)止,歷時(shí)22年。期間,得到了橡膠所許聞獻(xiàn)(已故)、吳繼林,學(xué)院董建華3位教授及本所同行熱情關(guān)心、鼓勵(lì)和支持;此外,還得到了鄭冠標(biāo)教授的一貫關(guān)注和指導(dǎo)。從大田調(diào)查、電鏡觀察、抗菌素診斷(探索)病原、嫁接傳病、血清學(xué)測(cè)定、分子診斷等多方面的試驗(yàn)研究結(jié)果,證明了橡膠樹(shù)褐皮病和橡膠樹(shù)叢枝病是屬于傳染性病害。這兩個(gè)病害的病原為黃化類病害的病原——類細(xì)菌體(BLO)和植原體(Phytoplasma)。然而,在皮接后的電鏡檢測(cè)中僅看到植原體,而未看到BLO。這可能是取樣不均,或BLO 濃度不高,不易找到帶菌的樣品。但看不到并不等于不存在,這一問(wèn)題有待后人繼續(xù)探討。此外,海南與云南兩省墾區(qū)的病原有什么差別和保01在這兩省的應(yīng)用效果為什么不一致,兩省墾區(qū)病原的生物遺傳特征是什麼,其在橡膠樹(shù)褐皮病組織、叢枝病組織內(nèi)是怎樣起作用的等問(wèn)題,均尚未搞清楚。由于自然規(guī)律的作用,我已退休了,只能帶著深深的遺憾離開(kāi)了我心愛(ài)的崗位,不可能再對(duì)上述問(wèn)題繼續(xù)研究。唯有盼望后人能接下去努力探索,能以當(dāng)今優(yōu)越的條件、先進(jìn)的科學(xué)技術(shù)來(lái)解決這些問(wèn)題,并能發(fā)現(xiàn)和解決更多更深的問(wèn)題。
(陳慕容 中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究員)
橡膠樹(shù)褐皮?。ㄋ追Q死皮病)是橡膠樹(shù)的一種世界性常見(jiàn)的重要割面病害,嚴(yán)重影響膠乳生產(chǎn)。
學(xué)術(shù)界對(duì)本病的研究由來(lái)已久。早在20世紀(jì)初,即1909年,Gallagher,W.J就開(kāi)始記載死皮的發(fā)生情況,至今已90多年。在這期間,人們對(duì)褐皮病的研究在生理學(xué)方面的研究較深較廣,學(xué)說(shuō)繁多,眾說(shuō)紛紜。但普遍認(rèn)為,死皮純屬于生理性病害。而在病理學(xué)方面,最早報(bào)道是1960年,Taysum認(rèn)為此病可能由某種病原細(xì)菌所致,Peries懷疑死皮與病毒有關(guān),但未見(jiàn)詳細(xì)的研究進(jìn)展報(bào)道。
20世紀(jì)70年代末,經(jīng)歷10年“文革”之后,時(shí)任植保系主任的鄭冠標(biāo)和我(學(xué)術(shù)秘書(shū))都想搞些科研。此時(shí),正值橡膠樹(shù)死皮病危害日益嚴(yán)重。鄭主任提出從病理學(xué)方面來(lái)探索研究橡膠樹(shù)死皮病的病因,因?yàn)檫@是經(jīng)歷幾十年未能解決的難題。面對(duì)這塊硬骨頭,我們啃得動(dòng)嗎?鄭主任鼓勵(lì)我和他一起摸索,我也抱著試試看的心態(tài)參與了這項(xiàng)研究工作。于是,從1979年開(kāi)始,我們天天跑林段,調(diào)查不同品系、不同樹(shù)齡膠樹(shù)的死皮病割面癥狀及樹(shù)冠的癥狀表現(xiàn)。我們一邊低頭查割面,一邊抬頭看樹(shù)冠,一株一株地細(xì)查。雖然脖子酸了,腿也軟了,眼又花了,但是,功夫不負(fù)有心人。我們終于發(fā)現(xiàn),死皮樹(shù)的樹(shù)冠也有癥狀,即有叢枝畸形枝條,死皮與這一癥狀可能有關(guān)系。這一跡象的發(fā)現(xiàn),使我們興奮得忘記了疲勞、饑渴。繼續(xù)查下去,連下班時(shí)間也忘了。調(diào)查中發(fā)現(xiàn)樹(shù)冠有畸形枝條(枝條莖干變扁、縮節(jié),其頂部葉片變小而成簇)的芽接樹(shù),90%會(huì)同時(shí)發(fā)生褐皮病,其余在半年至1年內(nèi)也會(huì)發(fā)生褐皮病,兩者關(guān)系密切。這一調(diào)查結(jié)果增強(qiáng)了我們進(jìn)一步深入研究褐皮病的信心。于是,我們立題從繼續(xù)大田調(diào)查及藥物診斷開(kāi)始,在國(guó)內(nèi)外首次從植物病理學(xué)方面,系統(tǒng)地研究橡膠樹(shù)褐皮病的傳染性。
我們的研究立題是“橡膠樹(shù)褐皮病的病因及其防治研究”,我們的研究工作就是圍繞病因及防治這兩大方面展開(kāi)的。
一、病因研究
1.藥物注射和環(huán)狀剝皮涂藥診斷病原。試驗(yàn)之前,在室內(nèi)用離體的病枝分別插入各種藥液,每天觀察枝條的反應(yīng)。藥物浸泡一周之后發(fā)現(xiàn),有幾種抗菌素處理的枝條存活時(shí)間最長(zhǎng),其余藥物處理的枝條都逐一枯死。我們根據(jù)這一預(yù)備性試驗(yàn)結(jié)果,開(kāi)始了藥物診斷病原的試驗(yàn)。
注射試驗(yàn)的材料是山東煙臺(tái)生產(chǎn)的仿美塑料注射器,采用自行車打氣筒通過(guò)不斷打氣加壓,把藥物輸入樹(shù)體內(nèi),使藥物在樹(shù)體內(nèi)產(chǎn)生藥效反應(yīng)。這個(gè)試驗(yàn)程序需要用較大而持久的體力,不斷加氣保持較大壓力注射藥液,已年過(guò)半百的鄭主任不顧自已年老體衰,硬是堅(jiān)持搶著干。大家在他的帶領(lǐng)下,終于順利完成了7個(gè)藥物注射試驗(yàn)。注射試驗(yàn)于1979年10月至1982年進(jìn)行了3次,采用青霉素、四環(huán)素;1983年第4至第7次采用保01、青霉素和四環(huán)素。注射試驗(yàn)結(jié)果表明:注射青霉素、四環(huán)素的病樹(shù),干膠增產(chǎn)效果明顯,用協(xié)方差分析,這兩種藥和清水對(duì)照之間差異顯著(P﹥0.05);保01注射1次,藥效可持續(xù)1年以上,其干膠增產(chǎn)效果在1年以內(nèi)較為顯著(P﹥0.05),與青霉素、四環(huán)素比較,藥效更穩(wěn)定,效果較優(yōu)。
環(huán)狀刮皮涂藥試驗(yàn)于1984年開(kāi)始小區(qū)試驗(yàn)和中間實(shí)驗(yàn)。其中小區(qū)試驗(yàn)是間隔期試驗(yàn),季度刮皮涂藥處理試驗(yàn)3個(gè),每月刮皮涂藥試驗(yàn)2個(gè)。試驗(yàn)結(jié)果表明,季度環(huán)狀刮皮涂藥對(duì)病情的控制效果優(yōu)于每月環(huán)狀刮皮涂藥。1984-1986年進(jìn)行了連續(xù)3年的刮皮涂藥小區(qū)試驗(yàn),并作病情比較分析。結(jié)果表明:抗菌素的防治效果是比較好的;第1個(gè)中間試驗(yàn)的是1984-1986年在試驗(yàn)農(nóng)場(chǎng)3隊(duì)28個(gè)樹(shù)位8400株膠樹(shù)中進(jìn)行,第2個(gè)是1985-1986年在西慶農(nóng)場(chǎng)5500株死皮樹(shù)中進(jìn)行。還有,在興隆華僑農(nóng)場(chǎng)以及南林、西聯(lián)、樂(lè)中等農(nóng)場(chǎng)進(jìn)行了5個(gè)推廣品系對(duì)保01的反應(yīng)試驗(yàn)(主要是對(duì)防治效果、干膠產(chǎn)量方面的影響),以上4個(gè)農(nóng)場(chǎng)參試樹(shù)總計(jì)為55168株。
1979-1986年,使用保01等藥劑的小區(qū)試驗(yàn)和中試結(jié)果表明:無(wú)論是年度間還是用不同的施藥方法,這些藥物在防治上都有效果。一是使干膠增產(chǎn),特別是無(wú)生產(chǎn)力的重病樹(shù)轉(zhuǎn)割陰刀,可恢復(fù)一定的產(chǎn)膠能力;二是發(fā)病率及發(fā)病指數(shù)有所降低,病情得到了控制。
2.電鏡檢查。在大田調(diào)查、藥物診斷的基礎(chǔ)上,還必須借助電鏡觀察,在病樹(shù)組織內(nèi)尋找病原物。當(dāng)時(shí)的熱作兩院還沒(méi)有電鏡,在院外電鏡檢測(cè)一個(gè)樣品就要4000多元,昂貴的檢測(cè)費(fèi)嚇得我們差點(diǎn)卻步不前。幸好遇到陳乃榮先生(當(dāng)時(shí)熱作所的科研人員),他得知我們的困難后,介紹中科院生化所彭加木(已故)、陳作義與我們合作,一起研究橡膠樹(shù)褐皮病,他們負(fù)責(zé)電鏡檢測(cè),研究成果共享。我們得到上海生化所所長(zhǎng)曹天欽的大力支持,在病毒組的陳作義、沈菊英協(xié)助下,幾經(jīng)檢測(cè),終于在1982年5月第1次在GT1和RRIM600的病樹(shù)割面組織內(nèi)觀察到多形態(tài)的RLO(現(xiàn)稱類細(xì)菌體BLO)。接著1983年2月初,在3株GT1病樹(shù)根部皮層組織中也觀察到各種形態(tài)的RLO。1983年6月,在IAN6645及PB28/59病樹(shù)樹(shù)冠上的叢枝病枝中又觀察到RLO,而健康對(duì)照樣品均未發(fā)現(xiàn)RLO。1989年在混合品系的病樹(shù)叢枝樣品中發(fā)現(xiàn)RLO和MLO(現(xiàn)稱為植原體phytoplasma)。由于割面病組織內(nèi)、病根部組織中的RLO病理學(xué)形態(tài)、大小與樹(shù)冠叢枝病枝組織內(nèi)的相似,同時(shí),凡有叢枝病的橡膠樹(shù)(60%的實(shí)生樹(shù)和90%的芽接樹(shù))的割面都同時(shí)會(huì)有褐皮病,其余的半年至一年也會(huì)發(fā)生褐皮病,兩者關(guān)系密切。因而我們認(rèn)為,樹(shù)冠的叢枝病可能就是褐皮病的一種癥狀。
從上述用保01、青霉素、四環(huán)素等藥劑防治褐皮病有療效,而用電鏡觀察又在病樹(shù)根莖葉組織內(nèi)發(fā)現(xiàn)了RLO的事實(shí),可以認(rèn)為橡膠樹(shù)褐皮病的病原就是RLO(BLO)。橡膠樹(shù)叢枝病是由RLO和MLO混合侵染所致。
3.嫁接傳病試驗(yàn)。其目的是證明橡膠樹(shù)褐皮病、橡膠樹(shù)叢枝病的傳染性,以及兩病的相互關(guān)系。傳病試驗(yàn)包括芽接和皮接兩個(gè)試驗(yàn)。
①芽接傳病試驗(yàn)。于1983年7月和1985年5月分別處理。試驗(yàn)結(jié)果表明,從芽接到芽接株發(fā)病,歷時(shí)均21個(gè)月左右,即叢枝病潛伏期約為21個(gè)月。傳染性測(cè)定:第1次處理,用病芽片嫁接的砧木上抽出不定芽發(fā)病率為21.67%,而健芽片嫁接健砧木的對(duì)照發(fā)病率為0;第2次芽接叢枝病芽片的砧木抽出的不定芽發(fā)病率為22.86%,健芽片嫁接叢枝病砧木上長(zhǎng)出的不定芽發(fā)病率為22.22%,而對(duì)照(健芽×健砧木)發(fā)病率為0。上述結(jié)果可概括為,病芽片×健砧木(2次)、健芽片×病砧木,其發(fā)病率均為22%左右,而健芽片×健砧木發(fā)病率均為0。這說(shuō)明,橡膠樹(shù)叢枝病可以通過(guò)嫁接傳染,是一種傳染性病害。
橡膠樹(shù)叢枝病與褐皮病的關(guān)系測(cè)定。材料選用1983年7月芽接的叢枝病樹(shù)和同期芽接的健康樹(shù)(對(duì)照)各12株,于1988年5月16日開(kāi)割(即芽接傳病5年后),同年10月底停割,67割次,1989年5-10月,58割次。2年割膠過(guò)程中,健康對(duì)照樹(shù)的割皮鮮亮無(wú)斑塊,膠樹(shù)排膠正常,能測(cè)出干膠含量;而叢枝病樹(shù)上的割皮呈水漬狀,其中有2株病樹(shù)開(kāi)始出現(xiàn)褐斑。試割的12株病樹(shù)中,4株膠乳不能流到膠杯中,2株雖有少量膠乳流到膠杯內(nèi),但膠水稀,膠線薄,很難測(cè)出干膠含量,其余6株病樹(shù)從開(kāi)割至次年底割線一直干枯。試驗(yàn)結(jié)果表明,嫁接叢枝病芽片后的開(kāi)割膠樹(shù)從開(kāi)割就表現(xiàn)死皮癥狀、割皮干枯,印證了大田的調(diào)查結(jié)果,即膠樹(shù)樹(shù)冠有叢枝病的癥狀,割面90%出現(xiàn)干枯現(xiàn)象,表明了橡膠褐皮病與叢枝病關(guān)系密切。同時(shí),芽接傳病試驗(yàn)也使我們認(rèn)識(shí)到,苗圃的叢枝病芽條作為芽接材料的危害性,它是大田橡膠褐皮病的初侵染來(lái)源。這一發(fā)現(xiàn)為后來(lái)研制褐皮病綜合防治從苗圃抓起的技術(shù)提供了科學(xué)依據(jù)。
②皮接傳病試驗(yàn)。在我們進(jìn)行皮接傳病試驗(yàn)之前,有人曾在海南2個(gè)農(nóng)場(chǎng)搞過(guò)皮接橡膠褐皮病傳病試驗(yàn)而均未獲成功。因此,持生理學(xué)觀點(diǎn)的人更強(qiáng)調(diào)認(rèn)為,橡膠褐皮病純粹是生理病,而不是傳染病。更甚者有位院領(lǐng)導(dǎo)在1984年衛(wèi)星農(nóng)場(chǎng)的橡膠生理會(huì)議休息時(shí),當(dāng)著眾多會(huì)議代表的面說(shuō):“我認(rèn)為橡膠死皮就是生理病,我不會(huì)支持病理的?!蔽覀冎溃瑢?shí)踐是檢驗(yàn)真理的唯一標(biāo)準(zhǔn),而那位院領(lǐng)導(dǎo),在未做過(guò)多少試驗(yàn)的情況下就這么武斷地說(shuō),為此,我感到遺憾,更感到一種新的壓力。特別是1985年10月,鄭主任調(diào)離兩院后,我感到孤立無(wú)助,滿肚子怨氣。這時(shí),還有人幸災(zāi)樂(lè)禍地問(wèn)我:“鄭冠標(biāo)走了,死皮課題還搞嗎?”他這一問(wèn),倒是一下激發(fā)了我的斗志,我當(dāng)即回答:“一定要搞下去!”同時(shí),激動(dòng)地暗下決心:不搞個(gè)水落石出,誓不罷休!于是,冷靜下來(lái)后,我就計(jì)劃著開(kāi)始5省區(qū)的橡膠褐皮病流行規(guī)律調(diào)查、血清檢測(cè),并繼續(xù)進(jìn)行嫁接傳病試驗(yàn)。
回想在20世紀(jì)80年代初,我們?cè)?0齡開(kāi)割樹(shù)上重復(fù)進(jìn)行了多次皮接傳病試驗(yàn),但均告失敗。我們從多次失敗的教訓(xùn)中,認(rèn)真總結(jié),尋找出了失敗原因,認(rèn)為失敗與多方面的綜合因素有關(guān)。因此,從諸方面作了改進(jìn)。1987年開(kāi)始栽培橡膠苗作為5年后皮接的砧木。1993年和1995年2次皮接都邀請(qǐng)對(duì)芽接有豐富經(jīng)驗(yàn)的許來(lái)玉同志(橡膠所育種組科研人員)來(lái)幫助。他成功地解決了皮接時(shí)膠乳對(duì)接穗與砧木粘合的干擾。皮接之前,皮接材料砧木、接穗均作血清檢測(cè)各3次,選擇確定不帶菌的健康苗木作砧木,確定明顯表現(xiàn)陽(yáng)性的帶菌褐皮病株的病皮作為接穗,2次皮接傳病的成活株共19株,其中GT1作接穗的7株,RRIM600接穗的12株。皮接3個(gè)月后開(kāi)始表現(xiàn)癥狀,發(fā)病率在29%-50%之間。其癥狀是:砧木植株樹(shù)皮組織呈現(xiàn)出褐色斑紋或水漬狀病灶;5年后開(kāi)割,出現(xiàn)割線排膠不正常,割線有小段不排膠等現(xiàn)象。這些癥狀與大田開(kāi)割膠樹(shù)典型的褐皮病癥狀是相符的。皮接傳病成活株通過(guò)血清試驗(yàn),結(jié)果是:1993年皮接成活9株,其中5株呈陽(yáng)性反應(yīng),即5株試驗(yàn)樹(shù)已感染褐皮病,帶菌率為55.6%;1995年皮接成活10株,其中4株呈陽(yáng)性反應(yīng),即4株試驗(yàn)樹(shù)也感染褐皮病,帶菌率為40%。接著選擇在血清檢測(cè)中,呈現(xiàn)陽(yáng)性的感病樹(shù)取樣進(jìn)行電鏡檢測(cè)。通過(guò)電鏡檢查,在病皮韌皮部篩管細(xì)胞內(nèi),均可觀察到病原物——植原體,而在健康對(duì)照株的相應(yīng)部位則沒(méi)有發(fā)現(xiàn)植原體。這2次皮接傳病試驗(yàn)從1987年準(zhǔn)備苗木開(kāi)始,至1998年皮接傳病成功為止,歷時(shí)11年,從皮接的病樹(shù)癥狀表現(xiàn)、割膠觀察、血清檢測(cè)(微量沉淀和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)),以及電鏡檢查等試驗(yàn)均表明,橡膠褐皮病已通過(guò)皮接的方式傳染到健康樹(shù)上,橡膠褐皮病是可以通過(guò)嫁接(芽接、皮接)傳病的一種傳染性病害。
1988-1992年,我和黃慶春、羅大全(1990年開(kāi)始)、葉沙冰對(duì)華南5省區(qū)的橡膠墾區(qū)進(jìn)行了褐皮病發(fā)生規(guī)律調(diào)查。結(jié)果表明:緯度越低,發(fā)病越重,高溫多濕是褐皮病發(fā)生的重要條件;不同品系對(duì)褐皮病有不同的抗病力,PR107、GT1病情較輕,具有一定抗病力,而RRIM600、PB86則較感病;同一品系,樹(shù)齡越大,發(fā)病越重;采膠強(qiáng)度如割膠次數(shù)和深度、刺激劑等因素直接影響膠樹(shù)的抗病力,與發(fā)病有密切關(guān)系。從林段病株的非隨機(jī)分布,及病樹(shù)對(duì)抗菌素的明顯反應(yīng)的現(xiàn)象,可以看出橡膠樹(shù)褐皮病是一種傳染性病害。
4.血清學(xué)測(cè)定。采用叢枝病抗血清為抗體與待測(cè)樣品(抗原)起反應(yīng)的方法,測(cè)定樣品的病原的存在與滴定度(濃度)。典型橡膠褐皮病樹(shù)的檢測(cè),用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))技術(shù)檢測(cè)褐皮病樣品和橡膠叢枝病樣品,均表現(xiàn)有特異性反應(yīng),而健康長(zhǎng)春花則呈非特異性反應(yīng)。試驗(yàn)結(jié)果表明,橡膠褐皮病與橡膠叢枝病具有共同的抗原結(jié)構(gòu)。在試驗(yàn)中,使用長(zhǎng)春花毒株(即感染橡膠叢枝病的長(zhǎng)春花植株)制備的抗血清測(cè)定與橡膠叢枝病樹(shù)制備的抗血清測(cè)定結(jié)果一致,這種血清關(guān)系啟示我們,可以采用橡膠叢枝病抗血清檢測(cè)橡膠褐皮病。因此,在嫁接傳病試驗(yàn)中,我們不僅從癥狀表現(xiàn)方面選擇有病的接穗和健康的苗木,而且還使用橡膠叢枝病抗血清檢測(cè)接穗、砧木的帶菌情況(如前述)的技術(shù),從而提高了嫁接傳病試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。
5.分子檢測(cè)。主要應(yīng)用于檢測(cè)橡膠叢枝病植原體的存在。以感染橡膠叢枝病的長(zhǎng)春花總DNA為模板,通過(guò)特異引物P1、P2進(jìn)行PCR擴(kuò)增,可以擴(kuò)增出一條860 bp左右的片斷。而健康長(zhǎng)春花則不能擴(kuò)增出此片段。染病的橡膠樹(shù)(RRIM600、GT1)總DNA擴(kuò)增結(jié)果也與此相同,此860 bp的片斷與引物設(shè)計(jì)Oenothera植原體16 Sr DNA P1至P2之間的距離863 bp相符合,說(shuō)明已按預(yù)期設(shè)計(jì)擴(kuò)增出橡膠叢枝病植原體的部分16 Sr DNA序列,而且所設(shè)計(jì)的引物可以用做橡膠叢枝病PCR檢測(cè)試驗(yàn)材料。
核酸雜交結(jié)果顯示,感染叢枝病橡膠樹(shù)的樣品呈強(qiáng)烈的陽(yáng)性反應(yīng),而對(duì)照也有微弱的陽(yáng)性反應(yīng)。與PCR比較,說(shuō)明PCR檢測(cè)的靈敏度較核酸雜交高。橡膠樹(shù)叢枝病如前述由植原體和BLO復(fù)合感染,但由于對(duì)BLO的遺傳特征所知甚少,未見(jiàn)其16 Sr DNA序列報(bào)道,故未將其列為靶序列加以擴(kuò)增。
我們?cè)谒幬镌\斷病原、電鏡檢查、嫁接傳?。ㄑ拷觽鞑?、皮接傳?。?、大田發(fā)生規(guī)律調(diào)查、血清學(xué)測(cè)定、分子測(cè)定等試驗(yàn)中,從多方面證明了橡膠樹(shù)褐皮病、橡膠樹(shù)叢枝病的病原及傳染性。從總的來(lái)說(shuō),我認(rèn)為:
1.橡膠樹(shù)褐皮病在林段中呈非隨機(jī)分布,在平坦林地隨膠工割膠路線連株發(fā)生,在山地則隨環(huán)山行連株發(fā)生,說(shuō)明橡膠褐皮病存在相互傳染的跡象。1979-1986年7年中,使用保01、青霉素、四環(huán)素等抗菌素探索性防治褐皮病,無(wú)論在年度間重復(fù)或不同的施藥方法,這些抗菌素都有一定防治效果。試驗(yàn)結(jié)果表明,橡膠樹(shù)褐皮病對(duì)抗菌素的反應(yīng)是敏感的;芽接傳病試驗(yàn)樹(shù),從一開(kāi)割就發(fā)生死皮,橡膠樹(shù)褐皮病可以通過(guò)病皮皮接傳染;電鏡檢測(cè)證明,類細(xì)菌體(BLO)是橡膠樹(shù)褐皮病的重要致病菌之一。
2.橡膠叢枝病的致病力測(cè)定、抗菌素效果反應(yīng)及電鏡觀測(cè)等試驗(yàn)的結(jié)果表明,橡膠叢枝病是由植原體(即MLD)和類細(xì)菌體(BLO)混合侵染所引起的一種傳染性病害。
3.膠園實(shí)地多點(diǎn)調(diào)查,病芽嫁接的罹病膠樹(shù)與同齡對(duì)照健康樹(shù)的試割產(chǎn)膠表現(xiàn)及血清學(xué)測(cè)定、分子學(xué)檢測(cè)等試驗(yàn)的結(jié)果說(shuō)明,橡膠叢枝病和褐皮病有密切關(guān)系。通過(guò)橡膠叢枝病芽嫁接途徑可以引起橡膠褐皮病??梢哉J(rèn)為,增殖苗圃中嫁接叢枝病芽片是成齡開(kāi)割膠樹(shù)褐皮病的初侵染來(lái)源之一。
4.由于采膠強(qiáng)度過(guò)大引起的割面干涸(即死皮)是一種生理性病害,病樹(shù)休割一段時(shí)間后,可恢復(fù)產(chǎn)膠能力,因而這種割面干涸生理病是有可逆性的,而且沒(méi)有傳染性。而由BLO等病原菌引起的褐皮病,病樹(shù)割線不產(chǎn)膠一般是不可逆的(中輕病樹(shù)經(jīng)治療可以恢復(fù)產(chǎn)膠)。這種病理性褐皮病是有傳染性的。我們認(rèn)為,排膠量過(guò)大時(shí),由于降低了橡膠樹(shù)的抗病力,最初可能發(fā)生生理性干涸,但是若在病原菌存在的情況下,就會(huì)感染褐皮病,這就是人們所說(shuō)的先生理后病理的繼發(fā)性褐皮病。
5.試驗(yàn)樣品采集的時(shí)間、部位及樹(shù)齡大小與試驗(yàn)結(jié)果有重要關(guān)系。在春天,病原菌隨樹(shù)液回流到地上部位時(shí),采集葉、莖樣品,電鏡檢查可看到病原菌。皮接傳病試驗(yàn),砧木應(yīng)選用幼齡實(shí)生苗;接穗(病皮)宜選用經(jīng)檢測(cè)證實(shí)帶有褐皮病原的、同時(shí)發(fā)病較輕的植株,在病健交界處取樣,以保證樣品本身既能帶菌,又有較強(qiáng)的生命力,能與砧木的形成層愈合,把病害傳到健康砧木上。
二、防治研究
1.藥劑篩選。在藥物診斷病原過(guò)程發(fā)現(xiàn)保01、青霉素、四環(huán)素等抗菌素,對(duì)橡膠褐皮病樹(shù)有防病增產(chǎn)作用基礎(chǔ)上,進(jìn)行藥劑篩選試驗(yàn),結(jié)果均表明,上述3種藥劑的防效以保01為最好,藥效較穩(wěn)定。因此,大田防治應(yīng)用的農(nóng)藥選用了保01。
?。玻巹┑姆啦C(jī)理研究。試驗(yàn)結(jié)果表明,保01、青霉素防治橡膠褐皮病的作用機(jī)理,主要是通過(guò)抑制病原菌生長(zhǎng)和繁殖,以致破壞菌體,從而達(dá)到防病增產(chǎn)效果。
為了弄清楚所使用的藥物對(duì)干膠理化性能的影響,我們委托兩院加工所測(cè)定了用藥后的干膠理化性能。每種處理累積干膠2-3公斤供化驗(yàn)用?;?yàn)結(jié)果,保01、青霉素、四環(huán)素和清水對(duì)照等項(xiàng)處理的干膠,其理化性能(如華來(lái)氏塑性、硫化條件、卲氏硬度、定伸強(qiáng)力、扯斷拉長(zhǎng)率、扯斷強(qiáng)力、老化系數(shù)等)均屬正常值范圍,無(wú)不良表現(xiàn)。
保01對(duì)開(kāi)割樹(shù)褐皮病的生產(chǎn)性大田防治試驗(yàn),從1984-1990年,在33個(gè)農(nóng)場(chǎng)22萬(wàn)株樹(shù)上實(shí)施。在海南、云南、廣東等省不同地區(qū),以不同涂藥方法(環(huán)狀刮皮涂藥和割線涂藥法),不同品系和不同樹(shù)齡的開(kāi)割膠樹(shù)進(jìn)行了防病增產(chǎn)試驗(yàn)。同時(shí),還在海南龍江農(nóng)場(chǎng)42隊(duì)、21隊(duì)設(shè)立觀察點(diǎn),定樹(shù)位、定株、定病灶觀察。試驗(yàn)的結(jié)果是用藥后病灶明顯縮小。為了能獲得可靠的生產(chǎn)性大田使用的第一手材料,我們?cè)谡{(diào)查期間,每天清晨4點(diǎn)半鐘就起床,乘車到10多公里外的觀察點(diǎn)割一刀查一刀病情,所以,我們的司機(jī)說(shuō):“我最怕跟陳老師開(kāi)車,早早就要起床?!边@樣調(diào)查,雖然辛苦點(diǎn),但結(jié)果換來(lái)的是心里踏實(shí)和信心更足。大面積的防治試驗(yàn)和定點(diǎn)觀察的結(jié)果表明:施用濃度為500?g/ml的保01藥劑、間隔期1.5個(gè)月1次的割線涂藥法有良好的防治效果。在開(kāi)割幼樹(shù)上施用保01,對(duì)褐皮病有更顯著的預(yù)防效果。保01對(duì)中輕病樹(shù)有明顯的控制和治療作用。對(duì)因病停割樹(shù)復(fù)割,可在不同程度上恢復(fù)產(chǎn)膠能力。品系反應(yīng)和中試結(jié)果基本相同,RRIM600、PB86、GT1等品系防效較好,PR107反應(yīng)有地區(qū)差異。
橡膠樹(shù)褐皮病的發(fā)生、擴(kuò)展與多種因素有關(guān)。因此,對(duì)褐皮病的防治必須采用以防為主,綜合防治的措施。要從繁殖材料抓起,消滅苗圃內(nèi)的叢枝病株,連根挖起,燒毀叢枝病株,避免帶病芽條(芽片)芽接成苗后流入大田?;瘜W(xué)防治必須配合控制采膠強(qiáng)度,加強(qiáng)田間管理,才能有效地發(fā)揮藥物效力。因此,綜合防治技術(shù)包括:①消滅初侵染來(lái)源;②化學(xué)防治;③控制采膠強(qiáng)度;④加強(qiáng)膠園管理。“橡膠褐皮病綜合防治技術(shù)的研究”由本所負(fù)責(zé)制定計(jì)劃并實(shí)施,海南農(nóng)墾局農(nóng)林處范會(huì)雄、吳嘉漣、吳丁顏等人負(fù)責(zé)組織領(lǐng)導(dǎo)工作,以及總局屬下的黃嶺、晨星、中建、和嶺、新盈、昆侖等6個(gè)農(nóng)場(chǎng)組成綜防研究協(xié)作組。1992-1994年,參試開(kāi)割樹(shù)達(dá)172萬(wàn)株,其中開(kāi)割幼樹(shù)119萬(wàn)株,中齡以上復(fù)割病樹(shù)52萬(wàn)株。試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明,消滅初侵染來(lái)源,清除增殖苗圃1個(gè)叢枝病樹(shù)樁,即可避免24株帶病膠樹(shù)流入大田,減少經(jīng)濟(jì)損失0.65萬(wàn)元,同時(shí)還可提高土地資源利用率。化學(xué)防治的策略是,重點(diǎn)保護(hù)開(kāi)割幼樹(shù),全面涂施保01,其防治效果達(dá)極顯著水平。對(duì)1-3級(jí)中輕病樹(shù)施用保01,有較好的抑制和治療作用。對(duì)中齡以上因病停割樹(shù)復(fù)割施藥后,可在一定程度上抑制病灶擴(kuò)展。3年實(shí)踐證明,綜合防治褐皮病的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益是顯著的。消滅初侵染來(lái)源、保證健康苗出圃,可為國(guó)家節(jié)約大量投入資金和有效地利用土地資源,并為大田高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)打下良好基礎(chǔ)。以化學(xué)防治為主,綜合防治橡膠褐皮病的防治成本和經(jīng)濟(jì)效益比是1:6.23,平均單株純利達(dá)2.54元。保01與乙烯利混用后,不僅能同樣防病,還能增加干膠產(chǎn)量,其經(jīng)濟(jì)效益更高,防治成本與綜合經(jīng)濟(jì)效益比值是1:30.5,平均單株純利達(dá)6.80元。
保01與乙烯利混合施用的試驗(yàn),始于保01中試期間,在興隆農(nóng)場(chǎng)章創(chuàng)鵬技術(shù)員配合下,在該場(chǎng)實(shí)施,結(jié)果表明,保01與乙烯利混用可起到很好的防病增產(chǎn)作用。后來(lái),在綜合防治研究中,在室內(nèi)測(cè)定了乙烯利對(duì)保01藥效的影響,室外測(cè)定保01與乙烯利混用的增產(chǎn)效果。室內(nèi)與室外測(cè)定結(jié)果一致表明:保01與乙烯利混合使用后,兩種藥效不會(huì)互相干擾。大面積試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明,生產(chǎn)上應(yīng)用保01與乙烯利混用的技術(shù)措施,不僅可以防治褐皮病,而且還可以達(dá)到增加干膠的作用,同時(shí)混合后可節(jié)省施藥用工,從而降低生產(chǎn)成本,提高收入。
三、研究成果
本人自1985年開(kāi)始主持橡膠樹(shù)褐皮病研究以來(lái),執(zhí)行了1個(gè)國(guó)家自然科學(xué)基金課題、2個(gè)農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)課題研究項(xiàng)目,1個(gè)自選課題研究項(xiàng)目,獲得的成果如下:
1.1985-1990年“橡膠樹(shù)褐皮病病因及防治研究”(農(nóng)業(yè)部“七五”重點(diǎn)課題)。本項(xiàng)目于1990年12月通過(guò)農(nóng)業(yè)部主持的科技成果鑒定,核準(zhǔn)編號(hào)(91)農(nóng)科果鑒字171號(hào),1992年獲農(nóng)業(yè)部科技進(jìn)步三等獎(jiǎng)。專家鑒定意見(jiàn)認(rèn)為:“本研究在國(guó)內(nèi)外首次證明橡膠樹(shù)褐皮病是一種傳染性病害,明確了類立克次氏體(RLO現(xiàn)稱為BLO類細(xì)菌體),是橡膠樹(shù)褐皮病的主要病因之一。能結(jié)合生產(chǎn)上的重大問(wèn)題立題,指導(dǎo)思想明確,在死皮研究上立論獨(dú)創(chuàng)。該項(xiàng)研究在國(guó)際同類研究中處于領(lǐng)先地位。”
參加本項(xiàng)目研究的本單位人員有鄭冠標(biāo)、陳慕容、楊紹華、葉沙冰、唐文瑛、黎寶文、楊小英等,協(xié)作單位及人員有中科院上海生化所陳作義、沈菊英,海南農(nóng)墾局及下屬的樂(lè)中農(nóng)場(chǎng)、華僑管理局的興隆華僑農(nóng)場(chǎng)等。
2.1990-1992年“橡膠樹(shù)褐皮病傳染病因的研究”(國(guó)家自然科學(xué)基金課題)。按計(jì)劃完成,發(fā)表2篇論文。
3.1991-1995年“橡膠樹(shù)褐皮病傳播媒介及綜合防治技術(shù)的研究”(農(nóng)業(yè)部“八五”重點(diǎn)課題)。本項(xiàng)目的綜合防治技術(shù)研究,于1995年9月通過(guò)農(nóng)業(yè)部組織、中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院主持的科技成果鑒定,核準(zhǔn)編號(hào)(95)農(nóng)科果鑒字032號(hào)。1996年獲海南省科技進(jìn)步三等獎(jiǎng)。專家鑒定意見(jiàn)認(rèn)為,大面積開(kāi)展“橡膠樹(shù)褐皮病綜合防治技術(shù)的研究”,在國(guó)內(nèi)外尚屬首次報(bào)道,此項(xiàng)研究能急生產(chǎn)之所需,技術(shù)路線正確,數(shù)據(jù)可靠,該項(xiàng)研究在國(guó)內(nèi)外同類研究中處于領(lǐng)先水平。
參加本項(xiàng)目研究的人員有陳慕容、羅大全、黃慶春、葉沙冰,海南農(nóng)墾局范會(huì)雄、吳嘉漣、吳丁顏、朱炳彪、郭澤忠、吳清岳、陳興昌、陸智維等20人。
4.1990-1995年“保01防治橡膠樹(shù)褐皮病技術(shù)的推廣應(yīng)用研究”(自選項(xiàng)目)。本項(xiàng)目研究論文在中國(guó)熱帶作物學(xué)會(huì)1995年植保專委會(huì)年會(huì)上獲優(yōu)秀論文二等獎(jiǎng)。
發(fā)表本研究論文約20篇,其中,參加國(guó)際學(xué)術(shù)討論會(huì)3篇(1994,1997,1999年各1篇,均被收編出版),在學(xué)報(bào)類刊物發(fā)表論文7篇。
橡膠樹(shù)褐皮?。ú±硇运榔ぃ┑难芯浚瑥?979年開(kāi)始,直至2000年12月本人返聘結(jié)束時(shí)止,歷時(shí)22年。期間,得到了橡膠所許聞獻(xiàn)(已故)、吳繼林,學(xué)院董建華3位教授及本所同行熱情關(guān)心、鼓勵(lì)和支持;此外,還得到了鄭冠標(biāo)教授的一貫關(guān)注和指導(dǎo)。從大田調(diào)查、電鏡觀察、抗菌素診斷(探索)病原、嫁接傳病、血清學(xué)測(cè)定、分子診斷等多方面的試驗(yàn)研究結(jié)果,證明了橡膠樹(shù)褐皮病和橡膠樹(shù)叢枝病是屬于傳染性病害。這兩個(gè)病害的病原為黃化類病害的病原——類細(xì)菌體(BLO)和植原體(Phytoplasma)。然而,在皮接后的電鏡檢測(cè)中僅看到植原體,而未看到BLO。這可能是取樣不均,或BLO 濃度不高,不易找到帶菌的樣品。但看不到并不等于不存在,這一問(wèn)題有待后人繼續(xù)探討。此外,海南與云南兩省墾區(qū)的病原有什么差別和保01在這兩省的應(yīng)用效果為什么不一致,兩省墾區(qū)病原的生物遺傳特征是什麼,其在橡膠樹(shù)褐皮病組織、叢枝病組織內(nèi)是怎樣起作用的等問(wèn)題,均尚未搞清楚。由于自然規(guī)律的作用,我已退休了,只能帶著深深的遺憾離開(kāi)了我心愛(ài)的崗位,不可能再對(duì)上述問(wèn)題繼續(xù)研究。唯有盼望后人能接下去努力探索,能以當(dāng)今優(yōu)越的條件、先進(jìn)的科學(xué)技術(shù)來(lái)解決這些問(wèn)題,并能發(fā)現(xiàn)和解決更多更深的問(wèn)題。
(陳慕容 中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究員)
Copyright ? 中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院監(jiān)制
地址:中國(guó)海南省海口市龍華區(qū)學(xué)院路4號(hào) 郵編:571101
聯(lián)系電話:0898-66962965
電子郵箱:[email protected]